Нацiональна академiя медичних наук України
Державна установа «Національний науковий центр радіаційної медицини, гематології та онкології»

Гематологія і переливання крові

ISSN 3083-6875 (Print)

ISSN 3083-6883 (Online)

DOI: https://doi.org/10.33741/3083-6883.43.07

УДК: 678.744.7:577.454:547.426.1 – 311:612.111:57.086.13

РОЛЬ ІНГІБІТОРІВ РЕКРИСТАЛІЗАЦІЇ ЛЬОДУ В ПІДВИЩЕННІ ЕФЕКТИВНОСТІ КРІОКОНСЕРВУВАННЯ ЕРИТРОЦИТІВ У РОЗЧИНАХ НА ОСНОВІ ОКСИЕТИЛЬОВАНОГО ГЛІЦЕРИНУ

Пахомова Ю. С., Чеканова В. В., Дьяконенко Г. Ю.

Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, Харків, Україна

Анотація

Вступ. У статті розглядається можливість підвищення ефективності кріоконсервування еритроцитів людини шляхом застосування речовин, здатних впливати на процес рекристалізації льоду (полівінілового спирту з молекулярною масою 9 кДа (ПВС 9 кДа), сахарози та глюкози) у складі кріопротекторних розчинів.

Мета. Оцінити вплив комбінації оксиетильованого гліцерину зі ступенем полімерізації n = 25 та інгібіторів рекристалізації льоду (ПВС 9 кДа, сахарозою, глюкозою) на ефективність кріоконсервування еритроцитів.

Матеріали і методи. Дослідження проводили на еритроцитах людини, заморожених у рідкому азоті ( – 196 °C ) у таких кріопротекторних розчинах: 30 % ОЕГn=25; 20 % ОЕГn=25; 20 % ОЕГn=25 + 0,1 М глюкоза; 20 % ОЕГn=25 + 0,1 М сахароза; 20 % ОЕГn=25 + 10 мг / мл ПВС 9 кДа. Оцінювали показники гемолізу, гематокриту та осмотичної стійкості клітин. Статистичну обробку результатів проводили з використанням U-критерію Манна-Уітні.

Результати. Найнижчий рівень гемолізу кріоконсервованих еритроцитів виявлено у розчині, що містить 20 % ОЕГn=25 + 10 мг / мл ПВС 9 кДа. Додавання сахарози також сприяло підвищенню рівня збереження клітин, тоді як використання глюкози призводило до статистично значущого збільшення частки гемолізованих еритроцитів. Найвищі показники осмотичної стійкості еритроцитів (0,6 % NaCl – 17,2 (16,1 − 18,3) %, 0,9 % NaCl – 15,6 (13,8 − 17,4) %) отримані у розчинах, де ОЕГn=25 комбінувався з 10 мг/мл ПВС 9 кДа або 0,1 М сахарозою. Значення гематокриту статистично значуще не відрізнялися між всіма досліджуваними розчинами.

Висновки. Використання полівінілового спирту дозволяє знизити концентрацію ОЕГn=25 з 30 % до 20 % без значного погіршення якості кріоконсервованих еритроцитів за оціненими показниками. Сахароза також продемонструвала перспективні результати щодо підвищення рівня збереження еритроцитів під час кріоконсервування, на відміну від глюкози. Таким чином, застосування речовин здатних впливати на процес рекристалізації (ПВС 9 кДа, сахароза) у складі розчинів на основі ОЕГn=25, є перспективним напрямом для розробки ефективних протоколів зберігання еритроцитів людини.

Ключові слова: еритроцити людини, кріоконсервування, інгібітори рекристалізації, кріопротектори.

Повний текст та додаткові матеріали

Повний текст безкоштовно: PDF